明膠酶譜試劑盒操作注意事項！

1.制備聚丙烯酰胺時應注意排除氣泡。

2.明膠酶譜的活性受鈣離子，鋅離子，和PH值等因素的影響，因此緩沖液配制應嚴格準確，盡量用超純水，孵育溫度也掌握好。

3.用大梳子

4.孵育液的PHzui好在7.5-7.6，復性的TRITON時間長了會有絮狀物，所以實驗時盡量使用新鮮配置的。

5.孵育的37度不要在CO2培養箱中，因為會改變孵育液的PH值，在普通孵箱即可。

6.細胞樣本用PBS 5倍體積震蕩裂解,估算細胞的體積，然后加入5倍體積的PBS，渦旋振蕩15-30s,而后靜置或低速離心.或者手動震蕩。

7.組織或者細胞的話可以用PBS，也可以用低滲溶液如三分或者四分的生理鹽水按照5倍體積加入后震蕩裂解細胞，離心即可，步驟和提蛋白很相似即可,其實重點的步驟主要是采用低滲裂解液進行裂解，組織的話可以勻漿20-30次，然后10000轉左右離心，5分鐘取上清即可。